Microbiology Laboratory Turkey

Mikrobiyoloji Ile Ilgili Tüm Konuların Kısa ve Öz Anlatımları. Microbiology Lab Information.

Bu Blogda Ara(SEARCH)

MicroLab

katalaz etiketine sahip kayıtlar gösteriliyor. Tüm kayıtları göster
katalaz etiketine sahip kayıtlar gösteriliyor. Tüm kayıtları göster

3 Ekim 2018 Çarşamba

Ekim 03, 2018

BASİT BOYAMA

BASİT BOYAMA

Mikroorganizmaların ve özellikle bakterilerin mikroskobik morfolojilerinin incelenebildiği boyama yöntemidir. Bu amaçla farklı boyalar kullanılsa da en yaygını Löffler'in metilen mavisi çözeltisidir.
Bakteriler, kullanılan boyanın rengini alır.


Basit boyama yönteminde aşağıdaki işlemler sırasıyla uygulanır:

➧ 1.2’de belirtildiği şekilde preparat hazırlanır (yayma, kurutma, tespit). 
➧ Preparatın üzerine boya çözeltisi eklenerek kaplanır. 
➧ Yeterli süre (Löffler'in metilen mavisi kullanılmışsa 30–60 saniye, karbol fuksin kullanılmışsa 5–10 saniye, kristal viyole kullanılmışsa 20–30 saniye) beklenir. Eğer daha uzun süre temas olursa bakteriler ile diğer cisimlerin ayırt edilmesi güçleşir. 
➧ Boya dökülerek preparat distile suyla yıkanır. 
➧ Preparat havada veya kurutma kâğıdı ile kurutulur. 
➧ Mikroskopta incelenir. 


MİKROSKOBİK GÖRÜNTÜSÜ

INSTAGRAM

FACEBOOK

0
By on Hiç yorum yok:
Etiketler: , , , , , , , , , , , , , , , ,

27 Eylül 2018 Perşembe

Eylül 27, 2018

CATALASE TEST

CATALASE TEST

Catalase is the enzyme that breaks down hydrogen peroxide (H2O2) into H2O and O2. The oxygen is given off as bubbles in the liquid. The catalase test is primarily used to differentiate between gram-positive cocci. Members of the genus Staphylococcus are catalase-positive, and members of the genera Streptococcus and Enterococcus are catalase-negative.



Performing The Catalase Test


1. Grow the isolate(s) to be tested for 18-24 hours on a BAP at 35-37°C with ~5% CO2 (or in a candle-jar). 

2. From overnight growth on the BAP, use a disposable loop to carefully remove a colony and place it on a glass slide. • Do not transfer any of the blood agar to the slide as erythrocytes in the blood agar will cause a false-positive reaction. 

3. Add 1.0 ml of 3% H2O2 to the slide and mix with the bacteria. 

• H2O2 can be obtained from a commercial drug store. 
• After initially opening, store H2O2 at 4°C in a tightly closed bottle as it will slowly lose potency once opened. 

4. Observe the bacterial suspension on the slide immediately for vigorous bubbling. 

5. It is essential to use a known positive and negative quality control (QC) strain. A Staphylococcus spp. strain can be used for a positive control and a known S. pneumoniae strain or any other streptococcal spp., i.e., S. pyogenes can be used for a negative control.



Reading the catalase test results 

• The absence of bubbling from a transferred colony indicates a negative test. 
• Any bubbling from a transferred colony indicates a positive test.

Procedure of Catalase test (Slide Test)

  1. Transfer a small amount of bacterial colony to a surface of clean, dry glass slide using a loop or sterile wooden stick
  2. Place a drop of 3% H2O2 on to the slide and mix.
  3. A positive result is the rapid evolution of oxygen (within 5-10 sec.) as evidenced by bubbling.
  4. A negative result is no bubbles or only a few scattered bubbles.
  5. Dispose of your slide in the biohazard glass disposal container.

Tube Catalase Test
  1. Add 4 to 5 drops of 3% H2O2 (Hydrogen peroxide) to in a test tube
  2. Using a wooden applicator stick, collect a small amount of organism from a well-isolated 18- to 24-hour colony and place into the test tube (Note: Be careful not to pick up any agar (esp if using Blood Agar).- Explanation in precaution below)
  3. Place the tube against a dark background and observe for immediate bubble formation (O2 + water = bubbles) at the end of the wooden applicator stick.
                            


                                                Performing The Catalase Test

  


INSTAGRAM
https://www.instagram.com/microbiologylab_turkey/

FACEBOOK
https://m.facebook.com/mikrobiyolojilab/                                

0
By on Hiç yorum yok:
Etiketler: , , , , , , , , , , , , , , , , ,

26 Eylül 2018 Çarşamba

Eylül 26, 2018

KATALAZ TESTİ

KATALAZ TESTİ

Katalaz bir enzim olup, çoğunlukla aerobik mikroorganizmalar tarafından oluşturulur. Bu enzim, ortamdaki hidrojen peroksiti su ve oksijene ayrıştırır.


Aerobik ve pek çok fakültatif anaerobik mikroorganizma katalaz enzimine sahiptir. Stapylococcus, Micrococcus, Proteus, E.coli, Pseudomonas ve Bacillus katalaz pozitif bakterilere örnek gösterilebilir. Streptococcus, Leuconostoc, Lactobacillus gibi Laktik asit bakterileri ve Clostridium’lar genelde katalaz negatif bakterilerdir (bazı laktik asit bakteri suşlarının özellikle kan içeren besiyerinde katalaz testine pozitif netice verdiği bilinmektedir).

Sıvı veya katı bakteri kültürlerine H2O2 ilave edildiğinde, serbest oksijenin gaz kabarcıkları halinde gözlenir hale gelmesi, hidrojen peroksitin ayrışmasını, dolayısıyla da katalazın varlığını gösterir. 

Staphycoccusları, Streptococcuslardan ayırt edebilmek için besiyerinde oluşan hemoliz, koloni ve gram boyamanın özellikleri yeterli değildir. Bu ayrımı yapabilmek için katalaz testi kullanılır. Katalaz, streptokokların dışında birçok aerobik ve fakültatif bakteri tarafından üretilen bir enzimdir. Katalaz enzimi, eritrositlerde de bulunduğundan dolayı; test edilecek bakteri kolonisi, kan içermeyen bir besiyerinden alınır. 

Katalaz testinde, süspanse bakteri kolonisine hidrojen peroksit (H2O2), damlatarak katalaz enzimini tespit etmek amaçlanmaktadır. Sıvı ve katı besiyerlerinde üremiş bakterilere H2O2 ilave edildiğinde, oksijenin kabarcıklar halinde çıkması H2O2’nin ayrıştığını, dolayısıyla katalaz enziminin varlığını gösterir. Staphylococcuslar’da katalaz pozitif, Streptococcuslar’da ise katalaz negatiftir. 

Test, tüpte veya lamda olmak üzere iki şekilde yapılır.


 Tüpte katalaz testi
→ İncelenecek bakteri kolonisinden özeyle alıp temiz bir tüp içinde, bir
damla serum fizyolojik ile süspanse edilir.
→ Üzerine %3’lük H2O2 damlatılır ve karıştırılır.
→ Karışım içinde oksijenin açığa çıkması yani, hava kabarcıklarının
oluşması testin pozitif olduğunu gösterir.

                     


Lamda katalaz testi 
⟹ İncelenecek bakteri kolonisinden özeyle alınarak temiz bir lam üzerinde, bir damla distile su ile süspanse edilir. 
⟹ Üzerine %3’lük H2O2 damlatılır ve karıştırılır. 
⟹ Karışım içinde oksijene bağlı köpürme-hava kabarcıklarının oluşması, testin pozitif olduğunu gösterir. 

                                 
Katalaz test sonucu (-) ve (+) 

Değerlendirme
 Hidrojenperoksid katılmasından sonra kabarcıkların görülmesi veya çıkması pozitif reaksiyon olarak değerlendirilir. Şüpheli durumlarda mikroskop altında muayene yapılabilir. Reaksiyon en iyi pH 7.0 da meydana gelir ve oda sıcaklığında yapılır. Sonuçlar, negatif (-), zayıf (+), orta (++) ve kuvvetli (+++) pozitif olarak derecelendirilir.

                                                 KATALAZ TESTİNİN YAPILIŞI
                                    

INSTAGRAM
FACEBOOK
0
By on Hiç yorum yok:
Etiketler: , , , , , , , , , , , , , , , , , ,