Microbiology Laboratory Turkey

Mikrobiyoloji Ile Ilgili Tüm Konuların Kısa ve Öz Anlatımları. Microbiology Lab Information.

Bu Blogda Ara(SEARCH)

MicroLab

oxidase etiketine sahip kayıtlar gösteriliyor. Tüm kayıtları göster
oxidase etiketine sahip kayıtlar gösteriliyor. Tüm kayıtları göster

25 Ekim 2018 Perşembe

Ekim 25, 2018

PSEUDOMONAS (TÜRKÇE)

PSEUDOMONAS

Pseudomonas aeruginosa hareketli, sporsuz, kapsülsüz, gram (-) negatif basildir. Bazen çift çift, bazen de kısa zincirler halinde görünür. Çoğu kez bir ucunda tek, nadiren 2-3 kirpiği vardır ve çok hareketlidir. 

 Üreme Özellikleri  
Pseudomonas aeruginosa, aerob olmakla beraber anaerob üreyebilen türlerine de rastlanır. Optimal üreme ısısı 30-37oC‟dir. 42oC'de üreyebilmesi Pseudomonas aeruginosa için önemli bir özelliktir. Optimal pH'sı 7,2'dir. Hafif alkali ortamda bol ürer, kuruluğa fazla dirençli değildir; nemli güneşten uzak yerlerde, toprakta, yüzeysel sularda, yiyeceklerde, hastanelerde zemin ve aletler üzerine yerleşerek  uzun süre canlı kalır. Fırsatçı patojen olarak çeşitli hastalıklara yol açar. 

Adi besiyerinde üreyebilir; buyyonda yüzeyde zar yaparak bol ve homojen bir üreme gösterir; zarın hemen altında mavi-yeşil pigment oluşturur. Peptonlu suda da aynı şekilde ürer. Kanlı agarda hemoliz yapar. Hemoglobini tam olarak hemoliz ettiğinden kanlı agar besiyerindeki kolonilerin etrafında temiz ve berrak zon oluşturur. Pseudomonas aeruginosa kültürlerinde; inci beyazı koloni görüntüsü, tatlımsı aromatik meyve, menekşe, sabun gibi güzel kokusuyla tanınır. Pseudomonas aeruginosa piyosiyanin {mavi-yeşil), piyorubin (kırmızı-kahverengi) ve flöressein (yeşil-sarı ve flöresan) gibi pigmentler üretir. Flöresseini tüm Pseudomas türleri oluşturabilirken piyosiyanini, sadece Pseudomonas aeruginosa oluşturabilir. Bakterinin kesin tanısı, 42°C de üreme yetisi ve pigment üretiminin incelenmesiyle konur. Aerobik olmaları nedeni ile gıdaların yüzeyinde hızlı gelişebilmeleri sonucu okside ürünler ve mukoz madde oluşturur. Süt içinde de iyi ürer, sütün pıhtılaşmasında ve çıkardığı pigmentten dolayı sarı-yeşil renk almasına neden olur, laktoz (), H2S ve indol yapmaz, glikozda asit yapar, gaz yapmaz. 

 Antijenik Özellikleri 
Pseudomonas aeruginosa'da, O antijeni bulunur. Ayrıca H ve pilus antijenleri de saklanmıştır.  

Yaptığı Hastalıklar 
 Yara ve yanık enfeksiyonları, idrar yolu enfeksiyonları, menenjit, göz enfeksiyonları, bronşit ve bronkopnömoni, septisemi.    
GRAM STAINING


Laboratuvar Teşhisi   
İnceleme örnekleri: Kan, idrar, BOS, balgam, cerahat, yara ve yanık sürüntüleri.   
Teşhis Yöntemleri  
➤ Kültür; inceleme örnekleri, buyyon, adi jeloz, kanlı jeloz ve MacConkey gibi besiyerlerine ekilir. Saf kültürü elde edilir. 
➤ Biyokimyasal testler; biyokimyasal özellikleri değerlendirilerek teşhis edilir.  

OKSİDAZ TESTİ İÇİN TIKLAYIN
INSTAGRAM
FACEBOOK 
TWITTER


0
By on Hiç yorum yok:
Etiketler: , , , , , , , , , , , , ,

13 Ekim 2018 Cumartesi

Ekim 13, 2018

OKSİDAZ TESTİ

OKSİDAZ TESTİ

Sitokrom oksidaz, bazı bakteriler tarafından sentezlenen bir enzimdir. Oksidaz testi bu enzimin aktivitesini ölçmeye yarayan bir testtir. Sitokrom oksidaz, fenilendiamin bileşiklerini okside ederek koyu mavi renkli indofenole dönüştürür. Neisseria ve Pseudomonas türlerinde oksidaz pozitif, Enterobacteriaceae türlerinde negatiftir.

Testin Yapılış Tekniği;
➤ Steril bir petri kutusu içine yerleştirilmiş kurutma kağıdına 2-3 damla oksidaz
ayıracı (dimetil veya tetrametil fenilendiamin dihidroklorid) damlatılır.
➤ Üzerine, öze ile şüpheli koloniden bir miktar alınarak sürülür.
➤ 10-60 saniye içinde koyu mavi renk oluşması, testin pozitif olduğunu gösterir.
  
INSTAGRAM
FACEBOOK 
TWITTER

0
By on Hiç yorum yok:
Etiketler: , , , , , , , , , , , , , , ,
Ekim 13, 2018

OXIDASE TEST

OXIDASE TEST PROCEDURE

Oxidase Test
Many organisms that respire have the cytochrome C oxidase enzymes in their electron transport chain that transfers electrons to oxygen, reducing oxygen to either water or hydrogen peroxide.  (If the toxic hydrogen peroxide is generated, catalase will convert the hydrogen peroxide to water and oxygen.)  The tests described here use Kovac's  oxidase reagent (tetramethyl-p-phenylenediamine dihydrochloride) that changes color when it becomes oxidized by cytochrome C oxidase.  As this enzyme requires oxygen, it is present only in aerobes, a few microaerophiles, and facultative anaerobes.  Because all known strains that are oxidase positive are catalase positive (either +i or +s), but not all catalase positive strains are oxidase positive, these two tests together may really help narrow down the identification of an unknown.
➤ This test can be performed using one of two similar procedures, your instructor will inform you of which.

Purpose: 
to test for the presence of cytochrome oxidase.  This test is helpful in identifying members of Neisseria, Enterobacteriaceae, Pseudomonadaceae, to aid in differentiating Gram negative nonenterics from Enterobacteriaceae, and in identifying a few others.

 Colonial Growth Procedure:
➤ Have freshly grown growth in streaks, lines, or colonies on a solid media, such as Nutrient Agar or TSA.  Do not use blood agar plates as blood cells contain oxidase and may give a false positive reading.
➤ Watch the time closely.  Directly place two or three drops of the reagent onto some growth.
➤ Within 20 seconds, observe if the growth under the reagent turns blue.
➤ If the color changes blue within 20 seconds, record the test as positive for the presence of cytochrome C oxidase.
➤ Keep watching for a color change to blue within 30 seconds.  If the color changes to blue within 30 seconds, record the test as potentially positive or inconclusive.  If the color does not change to blue within 30 seconds, record your results as negative for the presence of cytochrome C oxidase.  Important, the reagent may oxidize on its own and turn blue, so a color change after 30 seconds is negative.
➤ Compare your results with both a positive and a negative control.

Oxidase Slide Procedure:
➧This procedure requires BBL's DrySlide TM from Becton Dickinson and Company.  These slides already have the reagent on them.
➧Use freshly grown growth or colonies from a solid media that is not blood agar, such as Nutrient Agar or TSA.  Old growth is not reliable.
➧Transfer a large colony or equivalent amount of cells to the reagent slides using a tool that is not metal. Sterile pipettes and the wooden handles of swab sticks are suggested.  Some use cotton swabs to transfer the cells, but too many cells often stay with the swab, so this is not recommended.  If you are unable to pick up a large colony of cells, an agar plug may be cut out of a spare plate of cells with cleaned instruments, remove and invert the plug with cleaned forceps, and place the cells on the plug directly on the BBL's DrySlide TM.  Do not allow the forceps to touch the slide.  (This procedure works well but will likely contaminate the plate, so make sure it is a spare plate.) 
➧Observe the slides for a color change to blue watching the time closely.
➧If the color changes to blue within 20 seconds, record the test as positive for the presence of cytochrome C oxidase.  If the color becomes blue within 30 seconds, record the test as probably positive.
➧If the color does not change to blue within 30 seconds, record the test as negative for the presence of cytochrome C oxidase.
➧Compare your results with both a positive and a negative control.  Note, many specimens will turn blue after 30 seconds from a side reaction, a few as early as 45 seconds, so watch the time closely and record these as negative.

Instructor Notes:
The reagent can oxidize (go bad) and should be tested with a known positive control.  If the reagent looks bad, do not use unless known controls test correctly.  Escherichia coli is oxidase negative and Bacillus subtilis, Alcaligenes faecalis, and the Pseudomonas species are all positive.  With the DrySlides, some known positive controls may not turn blue within 20 seconds (BD BBL's DrySlide TM Oxidase Product Insert, 2013) but usually do within 30 seconds.  The Colonial Growth procedure does seem to work better than the Slide procedure if fresh reagents and fresh cultures are used.  Not only is the Colonial Growth procedure easier to visibly observe than the Slide procedure, but the color change also occurs earlier and further away from the cutoff time.  Collin et al., 1989, say that a clean platinum wire may be used, but determining a clean from a mostly clean wire and a platinum from non-platinum wire may be too difficult for most students so that metal instruments are not recommended.  A trace of iron in a metal instrument that touches the reagent slide may result in a false positive result.  The oxidase test should not be performed on cells that have been grown in a medium containing glucose as glucose fermentation inhibits oxidase.  There are also other oxidase tests that use other reagents, but they are less sensitive than the test and reagent discussed here.


INSTAGRAM

FACEBOOK 

TWITTER

1
By on 1 yorum:
Etiketler: , , , , , , , , , , , , , ,