Microbiology Laboratory Turkey

Mikrobiyoloji Ile Ilgili Tüm Konuların Kısa ve Öz Anlatımları. Microbiology Lab Information.

Bu Blogda Ara(SEARCH)

MicroLab

kanlı agar etiketine sahip kayıtlar gösteriliyor. Tüm kayıtları göster
kanlı agar etiketine sahip kayıtlar gösteriliyor. Tüm kayıtları göster

24 Aralık 2018 Pazartesi

Aralık 24, 2018

Hemoliz Çeşitleri

Hemoliz Testi



Eritrositlerin parçalanması, hemolizin (haemolysin) enzimi ile olur. Bazı bakteriler, sahip oldukları çeşitli hemolizin enzimleriyle kandaki hemoglobini farklı derecede hemoliz etme yani parçalama yeteneğindedir. Kanlı agarda oluşturdukları hemolizin tipi, bakterilerin identifikasyonunda kullanılan çok önemli özellikleridir. Hemoliz testi, daha çok Streptococcus ve Staphylococcusları kendi içinde ayırma amacıyla kullanılır. Streptococcuslar kanlı agarda, α, β ve γ-hemolotik reaksiyon verir. 


Testin yapılış tekniği; 
  • İncelenecek bakteri kolonisinden öze ile alınıp koyun kanı içeren kanlı agar besiyerine ekim yapılır.  
  • Petri kutusundaki besiyeri etüvde, 37oC'de  2-7 gün inkübe edilir. 
  • Kanlı agarda oluşan koloniler etrafında oluşan hemoliz zonları, her gün incelenerek aşağıdaki şekilde değerlendirilir. 


Beta (β) Hemoliz: 
Koloni etrafındaki eritrositler tamamen parçalandığından tam hemoliz oluşur. Bakteri kolonisinin etrafında düzgün bir hatla çevrilmiş temiz ve tamamen şeffaf bir halka ile karakterizedir. 


Alfa (α) Hemoliz: 
Koloni etrafındaki eritrositler tam olarak parçalanmadığından tam olmayan hemoliz oluşur. Koloni etrafında demirli bileşiklerin oluşturduğu yeşil renkli, tam şeffaf olmayan bir halka şeklinde görülür. 


Gama (γ) Hemoliz: 
Koloni etrafındaki eritrositler parçalanmadığından hemoliz olmaz ve test, negatif olarak değerlendirilir. Bu gruptaki bakteriler, hemolizin enzimine sahip olmadığı için kanlı agarda hemoliz oluşturmaz.



0
By on Hiç yorum yok:
Etiketler: , , , , , , , , , , , , , ,

20 Kasım 2018 Salı

Kasım 20, 2018

Streptococcus (Streptokoklar)

Streptococcus (Streptokoklar)

Streptococcuslar hareketsiz, sporsuz, gram pozitif [ gram (+) ] bakterilerdir. Tek tek kok veya diplokokların yan yana gelmesi ile oluşur. Boyanarak mikroskopta incelendiğinde; tek bir hat boyunda bölündüklerinden ve bölünen koklar birbirinden ayrılmadığından, kısa ya da uzun zincirler halinde tespih tanesi gibi dizilmiş şekilde görünür. Streptokok zincirleri, genellikle 2-12 veya daha fazla kokdan oluşur. Bu koklar, yuvarlak, sferik (küresel), bazen de ovaldir. 


Üreme Özellikleri
 Streptococcusların birçok türü fakültatif anaerobken bir kısmı zorunlu aerobdur. Optimal üreme ısıları 37oC, optimal pH'ları 7.2-7.4‟tür. Streptokoklar kuruluğa dayanıklı, ısıya dirençsiz, Enterokoklar ise biraz daha dirençlidir. Kan ve serum ile zenginleştirilmiş besiyerlerinde daha iyi izole edilebilir ve ürerler. Bu tip besiyerinde üreyen streptokoklar, 12mm çapında “S” tipi koloni yapar. Geniş kapsüllü Streptokok kolonileri sümüksel özelliktedir. Fazla miktardaki hyalurinik asit jeli, koloniye parlak su damlası gibi görünüm verir. Kanlı agarda üremeleri sonucu cinslerine göre alfa, beta ve gama tipi hemoliz meydana getirirler.  
A grubu patojen Steptokoklar, organizma üzerinde yirmiden fazla madde salgılar. Isıya dayanıklı olma özelliği ile ekzotoksinlerden ayrılır. Kendilerine karşı organizmada meydana gelen antikorlarla nötralize olur. Sığır safrasının veya % 10 oranındaki safra tuzlarının etkisine dayanıklı olma özellikleri, pnömokoklardan ayırt edilmelerinde önemlidir. 

Streptococcusların Sınıflandırılması 
Streptococcusların çeşitli özellikleri dikkate alınarak farklı bilim adamları tarafından aşağıdaki sınıflandırmalar yapılmıştır. 
➧Brown, Streptokokları hemolotik özelliklerine göre üç gruba ayırmıştır.  
  • Beta Hemolitik Streptokoklar (Patojen Streptokoklar): Bakteri kolonisi etrafında şeffaf, renksiz, hemoliz halkası oluşturan, eritrositleri tam olarak parçalayan türdür.  
  • Alfa Hemolitik Streptokoklar (Saprofit Streptokoklar): Bakteri koloni etrafında yeşil bir hemoliz halkası oluşturan, eritrositleri methemoglobin safhasına kadar parçalayan türdür. 
  • Gama Hemolitik Streptokoklar (Saprofit Streptokoklar): Hemoliz oluşturmayan, eritrositleri parçalamayan non-hemolitik Streptokoklardır.



➧Lancefield, Streptokokları hücre duvarında bulunan C maddesi adı verilen karbonhidrat yapısının antijenik özelliğine göre A'dan H'ye ve K'dan V'ye kadar çeşitli serolojik gruplara ayırır. Klinikte en çok soruna neden olan A grubu beta hemolitik Streptokoklardır.  
➧Sherman, Streptokokların birçok özelliğini bir arada  değerlendirerek dört  gruba ayırmıştır. 
  • Piyojen Streptokoklar: Genellikle patojen streptokoklar bu grupta yer alır. Örnek: Streptococcus pyogenes. 
  • Viridans (Oral) Streptokoklar: Genellikle ağız, boğaz ve burun florasında bulunan streptokoklar bu grupta yer alır. Örnek:  Streptecoccus viridans. 
  • Laktik Streptokoklar: Non patojen, genellikle hemoliz yapmayan streptokoklardır. Sütteki laktozdan laktik asit yaparak sütü pıhtılaştırırlar. Örnek:  Streptecoccus lactis. 
  • Enterokoklar: Bağırsağın normal florasında bulunan hemoliz yapanı ya da yapmayanı da olan Streptokok türüdür. Örnek: Enterococcus. 


Antijenik Özellikleri  
Doğada oldukça yaygın olan Streptokoklar, insan ve hayvan florasından başka saprofit olarak süt ve süt ürünleri gibi besinlerde bulunur. Patojen olanları, insan ve hayvanlarda çeşitli enfeksiyonlara neden olur. Patojen olanlar içinde. en iyi antijenik özellik gösteren beta hemolitik streptokoklardır. Streptokokların hücre duvarında bulunan C maddesi karbonhidrat yapısının gösterdiği antijenik farklılıklara bakılarak hemolitik streptokoklar A, B, C, D, E, …V'ye kadar çeşitli serolojik gruplara ayrılır. Bunlardan başka Streptococcus pyogenes‟de bulunan M, T ve R adlı yüzey antijenleri ile de streptokoklar, alt gruplara ayrılır. 

Laboratuvar Teşhisi  
➤İnceleme örnekleri:  Boğaz ve burun sürüntüsü, balgam, idrar, kan, BOS, deri lezyonları, yara örneği, diğer vücut sıvıları. 
➤Teşhis yöntemleri 
  • Mikrobiyolojik örneğin direkt mikroskobik incelemesi; idrar, BOS gibi sıvı örnekler santrifüj edildikten sonra tüp dibindeki çöküntüden 1 damla, diğer inceleme örneklerinden ise çok az miktar alınarak temiz bir lam üzerine konur ve ince bir şekilde yayılarak havada kurutulur. Hazırlanan preparat, gram boyası ile boyanarak mikroskopta incelenir. 
  • Kültür; uygun yerden alınan mikrobiyolojik örnek, kanlı agara ekilir. Üreyen bakterinin koloni ve hemolitik özelliği incelenir. Anjin vakalarında, Streptokok anjininin klinik olarak difteri anjinine benzerliği nedeniyle etkenin, Corynebacterium diphteriae olabileceği düşünülerek löffler besiyerine de bir ekim yapılması uygun olur.  
  • Biyokimyasal testler; kültür sonrası A grubu Streptokokları diğer  Streptekoklardan ayırt etmek için Bacitracin testi (için tıklayın) yapılır. 
  • Serolojik testler 




INSTAGRAM
0
By on Hiç yorum yok:
Etiketler: , , , , , , , , , , , ,

5 Kasım 2018 Pazartesi

Kasım 05, 2018

OPTOCHIN TEST

OPTOCHIN TEST 

Susceptibility to optochin (ethylhydrocupreine hydrochloride) is a simple and reliable method of differentiating Streptococcus pneumoniae from other alpha-haemolytic Streptococci.
TEST PRINCIPLE
The optochin test detects an organisms susceptibility to the chemical optochin ethylhydrocupreine hydrochloride). The chemical tests the fragility of the bacterial cell membrane and causes Streptococcus pneumoniae to lyse due to changes in surface tension.
The optochin test is widely used in the form of filter paper discs, impregnated with ethylhydrocupreine hydrochloride which are applied directly to inoculated plates before incubation.

REAGENTS AND EQUIPMENT
Filter paper discs impregnated with 5µg of ethylhydrocupreine hydrochloride
Bacteriological straight wire/loop (preferably nichrome) or disposable alternative

 Quality Control Organisms
Positive control: Streptococcus pneumoniae 
Negative control: Streptococcus viridans 


 METHOD/PROCEDURE AND RESULTS
Pure colony
  • Streak a blood plate with the organism to be tested
  • Place an optochin disc in the centre of the inoculum
  • Incubate at 35-37o C for 18-24h in 5% CO2
  • Examine for zones of inhibition 

Specimen

  1. Streak the specimen onto a blood plate
  2. Place an optochin disc on the edge of the primary inoculum
  3. Incubate at 35-37oC for 18-24h in 5% CO2
  4. Examine for zones of inhibition 


Positive result 
Zone of inhibition of ≥5mm radius from  the edge of the disc eg test  organism is S. pneumoniae
Negative result 
No zone of inhibition, or a zone <5mm  radius from the edge of the  disc eg test organism is not  S. pneumoniae.


PRECAUTIONS/LIMITATIONS OF PROCEDURE
Some “viridans” streptococci may produce a small zone of inhibition. Equivocal results should be confirmed using the bile solubility test or by the use of a commercial kit.
False-negatives may be reported if cultures are incubated in high concentrations of CO2. 
Occasional strains of optochin resistant S. pneumoniae have been reported.

0
By on Hiç yorum yok:
Etiketler: , , , , , , , , , , , , ,

2 Kasım 2018 Cuma

Kasım 02, 2018

Basitracin Testi (Bacitracin Test)

Basitracin Testi (Bacitracin Test)

Basitrasin testi, A grubu beta hemolotik Streptococcusları diğer Streptococcuslardan ayırt etmek için yapılan bir testtir. 
Testin yapılış tekniği; 


➤Streptococcus şüphesi olan koloniler öze ile alınarak glikozlu buyyonda, homojenize edilir.  
➤Buyyondaki karışımdan eküvyon yardımıyla alınıp %5‟lik kanlı agar besiyerine homojen bir şekilde yayılır. 
➤0.04 ünitelik basitrasin emdirilmiş bir disk, besiyerinin ortasına yerleştirilir.  
➤Besiyeri, 37oC'de 18-24 saat etüvde inkübe edilir. 
➤Disk etrafında zon oluşması, bakterinin basitrasine duyarlı olduğunu ve büyük olasılıkla A grubu beta hemolotik Streptococcus varlığını gösterir. 
Basitrasin testinde disk etrafında zon oluşumu 



INSTAGRAM
FACEBOOK 
TWITTER

0
By on Hiç yorum yok:
Etiketler: , , , , , , , , , , , , , ,

1 Kasım 2018 Perşembe

Kasım 01, 2018

Optokin Testi

 Optokin Testi (Optochin Test)

Optokin testi, Streptococcus pneumoniae'yı diğer alfa hemolotik Streptococcus'lardan ayırt etmek için yapılır. 
Testin yapılış tekniği;


  • Koyun kanlı agar besiyerinde üreyen bakteri kolonileri üzerine optokin maddesi içeren kağıt disk yerleştirilir. 
  • Etüvde, 37 oC'de 18-24 saat inkübe edilir.
  • Disk etrafında oluşan zonun çapı ölçülerek değerlendirilir. Kullanılan diske göre; 
➤6 mm çaplı disk  ≥ 14mm 
➤10mm çaplı disk  ≥ 16mm 
➧Çıkan değerler, optokine duyarlı anlamına gelir. Bu durumda etkenin, Streptococcus pneumoniae olduğu düşünülür. 
Optokin testinde zon oluşumu 

INSTAGRAM
FACEBOOK 
TWITTER

0
By on Hiç yorum yok:
Etiketler: , , , , , , , , , , , , , ,