Microbiology Laboratory Turkey

Mikrobiyoloji Ile Ilgili Tüm Konuların Kısa ve Öz Anlatımları. Microbiology Lab Information.

Bu Blogda Ara(SEARCH)

MicroLab

koagülaz testi etiketine sahip kayıtlar gösteriliyor. Tüm kayıtları göster
koagülaz testi etiketine sahip kayıtlar gösteriliyor. Tüm kayıtları göster

23 Ekim 2018 Salı

Ekim 23, 2018

STAPHYLOCOCCUS SPP. (TÜRKÇE)

STAPHYLOCOCCUS SPP.

Staphylococcuslar hareketsiz, sporsuz, genellikle kapsülsüz, gram pozitif (+) bakterilerdir. Mikroskobik incelemede; yuvarlak koklardan oluşmuş Staphylococcus hücreleri, üreme sırasında birbirinden ayrılmayıp 3 boyut yönünde çoğaldıklarından üzüm salkımına benzer kümeler halinde görünür. 

 Üreme Özellikleri 
Staphylococcuslar fakültatif anaerobdur. Optimal üreme ısıları 37oC, optimal pH'ları 7.27.4'tür. Kuruluğa, ısıya, çeşitli antiseptik ve dezenfektanlara birçok bakteriye göre daha  dayanıklıdır; ancak kristal viyole ve malaşit yeşili gibi boyalara hassastır. Adi besiyerinde kolay ürer. Bu besiyerlerine kan ve glikoz ilavesiyle bakterinin üremesi artar. Bu tür ortamlarda S tipi koloni oluşturur. Koloniler, üreme ortamında renkleri ile ayrıcalık gösterir ve bazı Staphylococcusların oluşturduğu pigmentin rengini alır. 
Staphylococcus aureus on Blood Agar

➤ İnsanlarda enfeksiyona neden olan başlıca Staphylococcus türleri şunlardır; 
➧ Staphylococcus aureus, en çok enfeksiyona neden olan patojen türüdür. 
➧ Staphylococcus epidermidis, üst solunum yolu ve derinin florasında bulunur; vücut direnci düştüğünde fırsatçı enfeksiyonlara neden olur. 
➧ Staphylococcus saprophyticus, normal florada bulunmaz. Vücut direnci düştüğünde başta üriner sistem enfeksiyonları olmak üzere fırsatçı enfeksiyonlara neden olur. 
Antijenik Özellikleri 
Staphylococcuslar, antijen yapıları bakımdan kesin bir özellik göstermez. Staphylococcus aureus'un tiplendirilmesinde faj tiplendirmesi kullanılır. Gerektiğinde serolojik tiplendirmelerden de yararlanılır. 
Staphylococcus aureus’un Toksin ve Enzimleri 
  • Hemolysin; eritrositleri hemoliz eden toksindir. 
  • Lökosidin; lökositleri öldürücü etki gösteren, fagositozu önleyen toksindir. 
  • Nekrotoksin; dokuları öldürücü etki gösteren toksindir. 
  • Fibronilizin; fibrini eritip bakteriyi hapsolmaktan kurtaran toksindir. 
  • Enterotoksin; besin zehirlenmesine neden olan toksindir 
  • Plazma koagülaz enzimi; pıhtılaşması önlenmiş kanın plazmasını pıhtılaştıran ve patojenliği gösteren bir enzimdir. 
  • Hyalüronidaz enzimi (yayılma faktörü); bakterinin doku içinde yayılmasını sağlayan enzimdir. 
  • Penisilinaz enzimi; penisilinin yapısını bozarak etkisini ortadan kaldıran enzimdir. 
  • Jelatinaz enzimi; jelatini eriten enzimdir. 

Yaptığı Hastalıklar 
➨Deri Enfeksiyonları; apse, fronkül (çıban), sivilce, impetigo (iltihaplı deri enfeksiyonu), kan çıbanı, hordeolum (arpacık), paronişya (dolama), yara, yanık ve cerrahi yara enfeksiyonları.  
➨Solunum Yolu Enfeksiyonları; anjin, akut veya kronik farenjit, sinüzit, otitis media, stafilokok pnömonisi. 
➨Ürogenital Sistem Hastalıkları; piyelonefrit, salpenjit, otitis media, endometrit, servisit, böbrek apseleri. 
➨Sinir Sistemi Hastalıkları; menenjit, artrit, osteomyelit, besin zehirlenmesi ve sepsis yapar. 

 Laboratuvar Teşhisi  
İnceleme örnekleri: Balgam, cerahat, BOS, kan . 
Teşhis yöntemleri 
➧Mikrobiyolojik örneğin direkt mikroskobik incelemesi; direkt preparat hazırlanıp gram boyasıyla boyanarak mikroskopta incelenir. 
➧Kültür; kanlı agara ekim yapılarak üreyen bakterinin koloni ve hemoliz özellikleri incelenir. İzole edilen bir Staphylococcusun Staphylococcus aureus olup olmadığı; jelatinli besiyerine ve chapman besiyerine ekim yapılarak belirlenir. 
➧Biyokimyasal testler; katalaz ve koagülaz testleri yapılır. 

INSTAGRAM
FACEBOOK 
TWITTER

0
By on Hiç yorum yok:
Etiketler: , , , , , , , , , , , , ,

2 Ekim 2018 Salı

Ekim 02, 2018

COAGULASE TEST

COAGULASE TEST


 Coagulase test is done to distinguish Staphylococcus aureus from other Coagulase negative Staphylococcus (CONS) like Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus etc. Staphylococcus  aureus produces two types of coagulase, i.e. free coagulase and bound coagulase. Free coagulase is an extracellular enzyme that can be detected in tube coagulase test while bound coagulase is a cell wall associated protein that can be detected in slide coagulase test.



Principle of Tube Coagulase Test:

The free coagulase secreted by S. aureusreacts with coagulase reacting factor (CRF) present in plasma to form a complex, thrombin. This converts fibrinogen to fibrin resulting in clotting of plasma.

 Procedure For Tube Coagulase Test:
  1. Take three test tubes and label them as “test”, “negative control” and “positive control”.
  2. Fill each test tube with 1 ml of 1:6 dilution of rabbit or human plasma in normal saline.
  3. Add 0.1 ml of overnight broth culture to the tube labeled test. Also add 0.1 ml of overnight broth culture of known S. aureus to the tube labeled positive control and 0.1 ml of sterile broth to the tube labeled negative control.
  4. Incubate all the tubes at 37oC and observe up to four hours.

                                                                    
                                           


Principle of Slide Coagulase Test:


Bound coagulase is also known as clumping factor. It cross-links α and β chain of fibrinogen in plasma to form fibrin clot that gets deposited on the cell wall of the cocci. As a result, individual coccus sticks to each other and clumping can be observed.

Procedure for Slide Coagulase Test:
  1. Emulsify few colonies of Staphylococci from culture in a drop of normal saline on two ends of clean glass slide.
  2. Label one as “test” and the other as “control”. The control suspension serves to rule out false positives due to autoagglutination.
  3. Mix a drop of rabbit or human plasma with the test suspension.
  4. Observe agglutination or clumping of cocci. Agglutination within 5-10 seconds is considered as positive. Some strains of S. aureus may not produce bound coagulase, and such strains  must be identified by tube coagulase test.



Positive result is indicated by clotting of the plasma, which remains in place even after inverting the tube. If the test remains negative until four hours at 37oC, leave the tube at room temperature for overnight incubation. Some strains on continued incubation produce fibrinolysin that lyses the clot.
Slide coagulase test is useful as a screening test while tube coagulase test is useful in confirmation of coagulase test . Not all strains of S. aureus produce coagulase, such rare strains are identified by thermonuclease test. Some species of Staphylococci such as S. lugdunensis and S. schleiferi  are slide coagulase positive while S. hyicus and S. intermedius are tube coagulase positive.
Note: Citrated plasma should not be used as some citrate utilizing bacteria (Pseudomonas) may utilize citrate to give false positive result.


INSTAGRAM
https://www.instagram.com/microbiologylab_turkey/

FACEBOOK
https://www.facebook.com/mikrobiyolojilab/




0
By on Hiç yorum yok:
Etiketler: , , , , , , , , , , , ,
Ekim 02, 2018

KOAGÜLAZ TESTİ

KOAGÜLAZ TESTİ


 Koagülaz, özellikle patojen Staphylococcuslar tarafından üretilen ve fibrinojeni fibrine dönüştürerek plazmayı pıhtılaştıran bir enzimdir. Koagülaz testi, Staphylococcus aureus’un diğer Staphylococcuslardan ayırt edilmesinde kullanılan en önemli, enzimatik bir testtir. Staphylococcuslarda; serbest koagülaz ve bağlı koagülaz olarak iki enzim türü vardır. Serbest koagülazın varlığı tüpte koagülaz testiyle, bağlı koagülazın varlığı ise lamda koagülaz testiyle tespit edilir. Tüpte koagülaz testi, lamda koagülaz testine göre daha güvenilir sonuç verdiğinden tercih edilir. 

Testlerde reaktif olarak taze hazırlanmış ya da ticari olarak dondurularak kurutulmuş tavşan plazması kullanılır. Tavşan plazması, bazı patojenik bakteri türleri tarafından sentezlenen ve koagülaz enzimi tarafından fibrine dönüştürülen fibrinojeni içerir.




➤ Tüpte Koagülaz Testi 

Bu yöntemde amaç, bakterilerin bulundukları ortama saldıkları “bağlı olmayan-serbest koagülaz” enzimini tespit etmektir. 

Testin yapılış tekniği; 

↣ Staphylococcus şüphesi olan kolonilerden 0,5 ml alınıp tüpteki tavşan plazmasına eklenir. 
↣ Etüvde, 37oC’de 1- 4 saat süreyle bekletilir. 
↣ Plazmanın pıhtılaşıp akışkanlığını kaybetmesi yani, belirgin pıhtı oluşması pozitif, akışkanlığını sürdürmesi ise negatif olarak değerlendirilir. Pıhtı oluşmaması halinde süspansiyon oda ısısında 24 saate kadar bekletilir. Çünkü nadiren de olsa bazı izolatlar, geç dönemde plazmanın pıhtılaşmasına yol açabilir. 



➤ Lamda Koagülaz Testi 

Bu yöntemde amaç, bakterinin yüzeyinde bulunan bağlı koagülazı tespit etmektir. Testin yapılış tekniği; 

⇨ Lam üzerine bir damla distile su konur. 
⇨ Üzerine özeyle şüpheli bakteri kolonisinden alınıp karıştırılır. 
⇨ Daha sonra bir öze dolusu tavşan plazması ilave edilerek karıştırılır. 
⇨ 1-2 dakika içinde kümeleşme-pıhtılaşma olup olmadığına bakılır. 
⇨ Pıhtılaşma oluşması pozitif, oluşmaması ise negatif olarak değerlendirilir.


INSTAGRAM

FACEBOOK

0
By on Hiç yorum yok:
Etiketler: , , , , , , , , , , , , , ,