Amaç
Tifo'lu hastanın serumunda oluşan antikor düzeyinin gösterilmesidir.
Araç Gereçler
➧ Hasta serumu
➧ Antijenler (S. typhi O, S. typhi H, S. paratyphi BO, S. paratyphi BH, S.paratyphi AO ve S. paratyphi AH)
➧ Fizyolojik tuzlu su (FTS)
➧ Deney tüpleri
➧ Pipetler
Teknik
➤ Her tip antijen için 1/50, 1/100, 1/200, 1/400, 1/800, 1/1600 ve kontrol tüpü hazırlanarak üstü yazılır.
➤ 1/50 yazılı tüpe 1 ml, diğer tüplere 0. 5 ml fizyolojik tuzlu su konur.
➤ Ana dilüsyon tüpü için 9. 6 ml tuzlu su ve 0. 4 ml hasta serumu konur ve karıştırılır.
➤ Her antijen tipinin 1/50 yazan ilk tüpüne, bu ana dilüsyon tüpünden 1‟er ml dağıtılır.
➤ 1/50 yazan tüp pipetaj edilerek buradan 0. 5 ml alınıp 1/100 yazan tüpe 0.5 ml aktarılır.
➤ Ana dilüsyon, bu tüpte pipetaj edilip diğer tüpe geçilerek seri dilüsyon yapılır. 1/1600 yazan tüpte pipetaj yapıldıktan sonra 0. 5 ml dışarıya atılır.

Widal Test

The main principle of widal test is that if homologous antibody is present in patients serum, it will react with antigen in the reagent and gives visible  agglutination in the tube. The antigens used in the test are H and O antigens of Salmonella Typhi.                                                   
The titre of the patient serum using Widal test antigen suspensions is the highest dilution of the serum sample that gives a positive result (Titers are expressed by the denominator only, for example 1:256 is written 256). The sample which shows the titre of 100 or more for O agglutinations and 200 or more for H agglutination should be considered as clinically significant (active infection).

Demonstration of 4-fold rise between the two is diagnostic. H agglutination is more reliable than O agglutinin. Agglutinin starts appearing in serum by the end of 1st week with sharp rise in 2nd and 3rd week and the titre remains steady till 4th week after which it declines.

Morfolojisi 
 Salmonella typhi genellikle hareketli, sporsuz, kapsülsüz, gram (-) basildir. Salmonella pullonum ve Salmonella gallinarum bu gruba ait hareketsiz bakteridir. Bakteriyolojik boyalarla iyi boyanır. Salmonella paratyphi A hariç çoğunda fimbria bulunur.
 Üreme Özellikleri 
Salmonella typhi, aerop veya fakültatif anaerop basildir. Optimal üreme ısısı 37oC olmakla birlikte 20-40oC‟de de üreyebilir. Optimal pH‟sı 7.2-7.4‟dür. Kuruluğa, gün ışığına ve antiseptiklere duyarlıdır.  Soğuğa, nemli ortamlara ve malaşit yeşili gibi bazı boyalara çok dirençlidir. Soğukta aylarca canlı kalabilir. Buyyon vb. sıvı besiyerinde homojen bulanıklık yapar. Jeloz besiyerinde 2 3mm çapında yuvarlak, kabarık, düzgün yüzeyli, düz kenarlı koloni yapar. Salmonella typhi bazen ilk 24 saatte 0,2 - 0,3mm çapına ulaşabilen cüce koloniler de yapabilir. Laktoz (-) oldukları için EMB ve ENDO agarda renksiz koloniler oluşturur. S, R, ve M tipi koloni yapabilir. Salmonella paratyphi A dışında  çoğu, H2S üretir; üreyi parçalamaz. Salmonella typhi hariç glikozu gaz yaparak asit oluşturur. İndol (-), Voges-Proskauer (-), metil kırmızısı pozitifdir.

Diagnosis
Salmonellosis should be considered in any acute diarrheal or febrile illness without obvious cause. The diagnosis is confirmed by isolating the organisms from clinical specimens (stool or blood).

Diagnosis
The diagnosis of salmonellosis requires bacteriologic isolation of the organisms from appropriate clinical specimens. Laboratory identification of the genus Salmonella is done by biochemical tests; the serologic type is confirmed by serologic testing. Feces, blood, or other specimens should be plated on several nonselective and selective agar media (blood, MacConkey, eosin-methylene blue, bismuth sulfite, Salmonella-Shigella, and brilliant green agars) as well as intoenrichment broth such as selenite or tetrathionate. Any growth in enrichment broth is subsequently subcultured onto the various agars. The biochemical reactions of suspicious colonies are then determined on triple sugar iron agar and lysine-iron agar, and a presumptive identification is made. Biochemical identification of salmonellae has been simplified by systems that permit the rapid testing of 10–20 different biochemical parameters simultaneously. The presumptive biochemical identification of Salmonella then can be confirmed by antigenic analysis of O and H antigens using polyvalent and specific antisera. Fortunately, approximately 95% of all clinical isolates can be identified with the available group A-E typing antisera. Salmonella isolates then should be sent to a central or reference laboratory for more comprehensive serologic testing and confirmation.

INSTAGRAM
https://www.instagram.com/microbiologylab_turkey/
FACEBOOK
https://www.facebook.com/mikrobiyolojilab/
TWITTER
https://twitter.com/MicrobioLabTurk